搖瓶機(jī)菌種培養(yǎng)說明四大步

*步：搖瓶機(jī)復(fù)蘇：根據(jù)所培養(yǎng)的細(xì)菌選擇適宜的培養(yǎng)基，大部分細(xì)菌在 LB 培養(yǎng)基中在超凈工作臺(tái)先用 1 毫升左右的適宜的培養(yǎng) 基溶解冷凍菌， 然后轉(zhuǎn)移到 10 毫升中試管 （放入 4 毫升液體培養(yǎng)基） 中，一般在 37 攝氏度搖床靜止或低轉(zhuǎn)速培養(yǎng) 12 小時(shí)或者過一晚（溫度 取決于所培養(yǎng)的細(xì)菌適宜生長的溫度）。

第二步：搖瓶機(jī)平板劃線培養(yǎng)：在平板（瓊脂+液體培養(yǎng)基）劃 線，放 37 攝氏度培養(yǎng)箱培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng) 6 小時(shí)~12 小時(shí)，在平板 上觀察是否形成了單菌落.

第三步：搖瓶機(jī)挑單菌落：在超凈臺(tái)中挑選典型單菌落，置入 10 毫升中試管（內(nèi)有 5 毫升液體培養(yǎng)基）中，在 37 攝氏度搖床，轉(zhuǎn) 速 200 轉(zhuǎn)培養(yǎng) 12 小時(shí)或者過一晚，肉眼能看到試管渾濁。

第四步：搖瓶機(jī)按照 1：20 的比例將中試管中的菌液移到 250 毫 升三角瓶（放入 100 毫升液體培養(yǎng)基），，培養(yǎng)條件同前。注意：所有的接種操作均需要在層流罩中，培養(yǎng)基應(yīng)無菌。

以上四步，搖瓶機(jī)是一般細(xì)菌培養(yǎng)都會(huì)涉及到的步驟，有些操作人員在實(shí)際搖瓶機(jī)試驗(yàn)過程中有時(shí)會(huì)省略復(fù)蘇這一環(huán)節(jié)， 直接拿燒熱 的接種環(huán)挑些菌液冰水，在平板上劃線培養(yǎng)，等長出菌落后，選取合 適的菌落搖瓶機(jī)培養(yǎng)。另外，要提醒大家的是：（1）搖瓶機(jī)是搖轉(zhuǎn) 方式進(jìn)行混合攪拌，而發(fā)酵罐是直接機(jī)械攪拌;（2）搖瓶機(jī)發(fā)酵罐可 以取樣或者儀表時(shí)時(shí)檢測(cè)， 但是搖瓶機(jī)因?yàn)榱啃〔荒芊奖愕倪M(jìn)行控制 和檢測(cè)，這些在后邊的文章會(huì)詳細(xì)介紹到，大家先做初步了解即可。

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